內(nèi)外結(jié)合胰島功能體外評估方法詳解

2018-11-12 來源：菲糖新動(dòng) 標(biāo)簽：掌上醫(yī)生喝茶減肥一天瘦一斤安全減肥 cps聯(lián)盟美容護(hù)膚

摘要：實(shí)驗(yàn)前各組大鼠自由攝食飲水，戊巴比妥鈉(50mg／kg，ip)麻醉下取出胰臟。雙重結(jié)扎腸系膜動(dòng)脈并剪斷、分離，取出十二指腸以下的全部腸管以充分暴露。

繼上個(gè)專題為大家介紹了β細(xì)胞功能的評估指標(biāo)與方法，這期專題我們主要集中在β細(xì)胞治療新技術(shù)方面。目前，在動(dòng)物模型中對胰島β細(xì)胞功能的評估并不僅限于活體內(nèi)，除葡萄糖耐量試驗(yàn)等體內(nèi)評估技術(shù)外，胰島表面灌注及離體胰腺灌注技術(shù)等體外評估技術(shù)也逐步應(yīng)用，今天我們就將為大家詳細(xì)介紹胰島功能的體外評估方法。

胰腺灌流

1966年，大鼠胰腺灌流方法由Sussman等學(xué)者首次建立，并先后由Assan、Giroix等進(jìn)行了改進(jìn)和完善，此后廣泛應(yīng)用于大鼠胰島β細(xì)胞胰島素分泌動(dòng)力學(xué)研究。下面是具體的操作流程：

胰腺分離:

實(shí)驗(yàn)前各組大鼠自由攝食飲水，戊巴比妥鈉(50mg／kg，ip)麻醉下取出胰臟。雙重結(jié)扎腸系膜動(dòng)脈并剪斷、分離，取出十二指腸以下的全部腸管以充分暴露。需盡可能高的結(jié)扎食管，并在結(jié)扎線上端剪開；另一未打結(jié)的結(jié)扎線環(huán)繞胃環(huán)肝系膜，在腹中線端點(diǎn)上、膈肌根部小心暴露主動(dòng)脈，然后系緊胃肝系膜上的結(jié)扎線，并于結(jié)扎上方剪斷系膜。在雙重鉗夾之間及下面鉗子的下方剪斷主動(dòng)脈，從腹腔取出胰臟。放開對著腹中線起端主動(dòng)脈切口上的夾子，露出主動(dòng)脈口，插入動(dòng)脈插管，在適當(dāng)?shù)奈恢迷o，使開口靠近結(jié)扎線，并靠近門脈末端。

灌流:

開始灌流，觀察液體從門靜脈口流出。1～2min后，停止灌流，進(jìn)行門靜脈插管，以備收集灌流液。隨后恢復(fù)灌流，保持灌流壓力約為100mmHg。灌流溫度為37.5℃，灌流速度1.75mL/min。分別收集每分鐘的灌流液，共收集30min，-20℃保存，待查胰島素含量.

胰島灌流

目前在國內(nèi)基礎(chǔ)研究中，針對動(dòng)物模型所采用的胰島β細(xì)胞功能評估方法大多為分離胰島后，給予高糖/低糖刺激，并取其上清液測定胰島素濃度。這種方法反映了給予葡萄糖負(fù)荷后一定時(shí)間內(nèi)，分泌的胰島素總量，但不能同時(shí)反映胰島素在分泌時(shí)相和分泌數(shù)量方面的變化，且無法探究節(jié)律。而胰島灌流可以從分泌時(shí)相和分泌數(shù)量兩個(gè)方面評價(jià)胰島素分泌功能，更準(zhǔn)確的評估胰島功能。

離體胰島灌流系統(tǒng)

灌流準(zhǔn)備:

胰島分離后置于Hanks平衡液中，于二氧化碳孵箱38℃下孵育1h，并將胰島按每組50個(gè)進(jìn)行分組。將離體胰島灌流系統(tǒng)置于37℃下水浴，并將微最泵輸注系統(tǒng)與其連接。隨后將預(yù)先配置好的低糖灌流液充填至整個(gè)管道系統(tǒng)，在層析柱中加入葡聚糖凝膠，然后將每組50個(gè)胰島轉(zhuǎn)移至層析柱，再加入100ul葡聚糖凝膠。最后將整個(gè)管道系統(tǒng)全部浸入水浴。

灌流:

開始時(shí)用低糖灌流液以0.5ml／h的速度灌流1h，隨后換為高糖灌流液以1ml／h的速度灌流，并以開始高糖灌流時(shí)為0時(shí)間點(diǎn)，分別于灌流前30、20、10min、灌流后0、20、40、60、80、100s和2、3、4、5、7、8、9、10、15、20、25、30min收集灌流出的液體，-80℃下保存，隨后測定胰島素含量，并根據(jù)胰島素濃度繪制胰島素第一時(shí)相分泌曲線。

這些體外評估方法由于排除了體內(nèi)多種因素的干擾，能夠較準(zhǔn)確地評估胰島β細(xì)胞功能，是研究動(dòng)物模型不同病理生理狀態(tài)下胰島β細(xì)胞胰島素分泌能力變化及機(jī)制、以及各種營養(yǎng)物質(zhì)和藥物對胰島β細(xì)胞功能影響及其作用機(jī)制的重要手段。

看本篇文章的人在健客購買了以下產(chǎn)品更多>

本品不能代替藥物

健客價(jià)：￥360

強(qiáng)身補(bǔ)腦，固腎補(bǔ)氣，增進(jìn)食欲。用于腎虧陽弱，記憶減退，夜夢精溢，腰酸腿軟，氣虛咳嗽，五更溏瀉，食欲不振。

健客價(jià)：￥1329

前列舒樂膠囊：補(bǔ)腎益氣，化瘀通淋。用于腎脾雙虛，氣滯血瘀，前列腺增生，慢性前列腺炎；面色晃白，神疲乏力，腰膝疲軟無力，小腹墜脹，小便不爽，點(diǎn)滴不出，或尿頻、尿急、尿道澀痛。前列安栓：本品功效為清熱利濕通淋，化瘀散結(jié)止痛。主治濕熱瘀血雍阻證所引起的少腹痛、會陰痛、睪丸疼痛、排尿不利、尿頻、尿痛、尿道口滴白、尿道不適等證?？捎糜诰珴帷诐?、勞淋（慢性前列腺炎）等病見以上證候者。

健客價(jià)：￥318

該產(chǎn)品適用于測量18周歲及以上的成人組織間液中的葡萄糖水平,用于糖尿病的自我管理,不能作為治療藥物調(diào)整的依據(jù)。掃描檢測儀中內(nèi)置的血糖血酮檢測模塊可用于測量采自指尖、前臂、上臂或拇指根部新鮮毛細(xì)血管全血中的葡萄糖濃度，和采自指尖和靜脈的新鮮全血中的β-羥丁酸濃度，不能用于糖尿病的診斷和篩查，也不能作為治療藥物調(diào)整的依據(jù)。與其配套的輔理善瞬感軟件可以幫助患者或醫(yī)護(hù)人員查看、分析和評估由掃描式葡萄糖監(jiān)測

健客價(jià)：￥454

前列解毒膠囊：解毒利濕，通淋化瘀。用于慢性前列腺炎屬濕熱挾瘀證，癥見：小便頻急、尿后余瀝、尿后滴白、尿道澀痛、少腹疼痛、會陰不適、腰骶疼痛、陰囊潮濕、睪丸疼痛。前列安栓：清熱利濕通淋，化瘀散結(jié)止痛。主治濕熱瘀血雍阻證所引起的少腹痛、會陰痛、睪丸疼痛、排尿不利、尿頻、尿痛、尿道口滴白、尿道不適等證?？捎糜诰珴?、白濁、勞淋（慢性前列腺炎）等病見以上證候者。

健客價(jià)：￥609

他達(dá)拉非片：治療男性勃起功能障礙。益腎壯陽膏：補(bǔ)腎壯陽、活血通絡(luò)。用于陰莖勃起功能障礙，中醫(yī)辨證屬腎陽虛者。

健客價(jià)：￥739

前列安栓(麗珠)：本品功效為清熱利濕通淋，化瘀散結(jié)止痛。主治濕熱瘀血雍阻證所引起的少腹痛、會陰痛、睪丸疼痛、排尿不利、尿頻、尿痛、尿道口滴白、尿道不適等證?？捎糜诰珴帷诐?、勞淋（慢性前列腺炎）等病見以上證候者。前列回春膠囊(雙星)：益腎回春，活血通淋，清熱解毒。用于慢性前列腺炎以及由前列腺炎引起的尿頻、尿急、尿道澀痛、淋濁、性欲減退、陽萎早泄等癥。

健客價(jià)：￥549

1.用于單純飲食控制不滿意的2型糖尿病患者，尤其是肥胖者，還可能有減輕體重的作用。 2.對某些磺酰脲類療效差的患者可奏效。 3.可與磺酰脲類或胰島素合用以改善血糖控制。

健客價(jià)：￥5.5

卡泊三醇軟膏(金迪銀)：用于尋常型銀屑病的局部治療。迪銀復(fù)方氨肽素片：用于銀屑病（牛皮癬）。

健客價(jià)：￥789

龜齡集：強(qiáng)身補(bǔ)腦，固腎補(bǔ)氣，增進(jìn)食欲。用于腎虧陽弱，記憶減退，夜夢精溢，腰酸腿軟，氣虛咳嗽，五更溏瀉，食欲不振。龜鹿補(bǔ)腎片：壯筋骨，益氣血，補(bǔ)腎壯陽。用于身體虛弱，精神疲乏，腰腿酸軟，頭暈?zāi)垦?，腎虧精冷，性欲減退，夜多小便，健忘失眠。益腎壯陽膏：補(bǔ)腎壯陽、活血通絡(luò)。用于陰莖勃起功能障礙，中醫(yī)辨證屬腎陽虛者。

健客價(jià)：￥1219

用于治療精神分裂癥。? 在精神分裂癥患者的短期（4周和6周）對照試驗(yàn)中確立了阿立哌唑治療精神分裂癥的療效。選擇阿立哌唑用于長期治療的醫(yī)生應(yīng)定期重新評估該藥對個(gè)別患者的長期療效。

健客價(jià)：￥45

美沙拉秦栓(天宏)：用于潰瘍性結(jié)腸炎。一些病例在醫(yī)生建議下可合用美沙拉秦片劑。美沙拉秦緩釋顆粒(艾迪莎)：潰瘍性結(jié)腸炎的急性發(fā)作；防止復(fù)發(fā)。頻繁發(fā)病的克羅恩病病人，預(yù)防急性發(fā)作。

健客價(jià)：￥660

本品適用于 - 治療骨關(guān)節(jié)炎急性期和慢性期的癥狀和體征 - 治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎 -治療原發(fā)性痛經(jīng) 處方選擇性環(huán)氧化酶-2抑制劑應(yīng)基于對個(gè)體患者風(fēng)險(xiǎn)的全面評估（參見【注意事項(xiàng)】）。

健客價(jià)：￥33.5