聚合酶鏈式反應介紹:
聚合酶鏈式反應是一種在體外快速擴增特定基因或DNA序列的方法,故又稱為基因的體外擴增法。PCR技術類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。
聚合酶鏈式反應正常值:
體內(nèi)菌群的種類和比例正常,人體處于動態(tài)平衡健康狀態(tài)。
聚合酶鏈式反應臨床意義:
PCR能快速特異擴增任何已知目的基因或DNA片段,并能輕易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因擴增達到納克、微克、毫克級的特異性DNA片段。因此,PCR技術一經(jīng)問世就被迅速而廣泛地用于分子生物學的各個領域。
異常結果:各種疾病所致的異常,例如梅毒。
?、僖黄诿范尽<从蚕吗?,潛伏期2~4周,外生殖器部位發(fā)生暗紅色硬腫塊、淺潰瘍,有軟骨樣硬度,周圍淋巴結腫大。
?、诙诿范?。在一期梅毒1~2個月之后,全身皮膚、粘膜發(fā)生對稱泛發(fā)皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。粘膜可發(fā)生粘膜斑、扁平濕疣,傳染性強。
?、廴诿范尽0l(fā)生在感染后2~3年乃至10年,皮膚為樹膠樣腫,還可涉及骨、關節(jié)、心、血管,表現(xiàn)為主動脈炎、主動脈瓣閉鎖不全和主動脈瘤等,侵及神經(jīng)為脊髓癆,全身麻痹(麻痹性癡呆)等等。
需要檢查的人群:疑似某種特定的疾病病人,進行分子特異性檢查。
聚合酶鏈式反應注意事項:
不合宜人群:沒有
檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個人衛(wèi)生。
檢查時要求:積極配合醫(yī)生
聚合酶鏈式反應檢查過程:
PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:
?、倌0錎NA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;
?、谀0錎NA與引物的退火(復性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;
?、垡锏难由欤篋NA模板--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。到達平臺期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
PCR技術敏感性高,特異性強,操作簡便、快速,在生命科學研究、食品衛(wèi)生、醫(yī)療、法醫(yī)及環(huán)境監(jiān)測等諸多方面都具有重要的應用價值。
聚合酶鏈式反應一般費用:
120元