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蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)對RPE細胞的影響

2018-07-20 來源:協(xié)和眼科資訊  標簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR),是眼科臨床比較常見的體征,目前PVR纖維增殖膜的細胞成分已經(jīng)明確,而且公認RPE細胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程(EMT)對PVR的發(fā)生起著作用,EMT可以使細胞外基質(zhì)在纖維增殖膜中過度沉積,但是EMT發(fā)生的機制尚不清楚。

增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR),是眼科臨床比較常見的體征,目前PVR纖維增殖膜的細胞成分已經(jīng)明確,而且公認RPE細胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程(EMT)對PVR的發(fā)生起著作用,EMT可以使細胞外基質(zhì)在纖維增殖膜中過度沉積,但是EMT發(fā)生的機制尚不清楚。

蛋酪氨酸磷酸酶(PTPs)作為生物體內(nèi)一種重要的功能酶,對細胞的增殖活動起重要的調(diào)節(jié)作用,并且在維持細胞-細胞和細胞-細胞外基質(zhì)連接中起作用。以往研究證實蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)抑制劑正釩酸鈉(SOV)可以加速RPE細胞周期,影響RPE細胞正常分化。PTPs抑制劑可能是使RPE細胞發(fā)生EMT的原因。蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)是一種非受體型PTPs,主要位于胞漿內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,TCS-401是一種選擇性PTP1B抑制劑。

方法:建立視網(wǎng)膜脫離動物模型(SD大鼠右眼用30G針頭經(jīng)鞏膜注射透明質(zhì)酸鈉到視網(wǎng)膜下,左眼為正常對照組),取實驗動物RPE細胞培養(yǎng),分離神經(jīng)上皮、RPE和Bruch膜。通過免疫熒光染色、蛋白提取和免疫印記(WesternBlot)等方法對相關(guān)蛋白、細胞成分和RPE細胞遷移率進行測定。

結(jié)果與結(jié)論:PTP1B在視網(wǎng)膜脫離區(qū)域表達減少(圖1,熒光減弱);加入了TCS-401之后,RPE細胞的增殖增多,細胞因子A和細胞因子D(cyclinA和D1)表達升高;PTP1B抑制劑TCS-401增加了RPE細胞向成纖維細胞的分化,同時也增加了RPE細胞的遷移。而TCS-401活化了Erk和Akt信號傳導(dǎo)通路,說明Erk和Akt信號傳導(dǎo)通路可能在PVR形成過程中起作用。

圖1,PTP1B(綠色熒光)在視網(wǎng)膜脫離區(qū)域表達減少;1A顯示視網(wǎng)膜脫離模型,1B和1C分別為網(wǎng)膜模型組合對照組的PTP1B表達

圖2,顯示不同濃度TCS-401對RPE細胞向成纖維細胞分化的影響,TCS-401能夠促進RPE細胞向成纖維細胞的分化,且促進分化的能力同TCS-401濃度呈正相關(guān)

本文第一次研究了PTP1B在RPE中的表達,以及PTP1B抑制劑在調(diào)節(jié)RPE細胞增殖、分化和遷移過程中的作用。對Erk和Akt信號傳導(dǎo)通路在PVR形成過程中的作用做出了預(yù)測,為PVR發(fā)生機制的研究拓展了方向。

(正文所有圖片均來自原文)

原文:Proteintyrosinephosphatase1Bregulatestheactivityofretinalpigmentepithelialcells,Zhao-DongDu,etal.MolecularVision2015;21:523-531

短評:

基礎(chǔ)研究需要敏感的科學(xué)眼光和一絲不茍的科研精神。細胞的增殖、遷移、轉(zhuǎn)化、凋亡是一個非常復(fù)雜的過程。各個因子在這個網(wǎng)絡(luò)中的作用也同樣復(fù)雜難辨。本研究聚焦于增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變這一治療難點,通過嚴密的實驗設(shè)計首次證實了PTP1B在視網(wǎng)膜脫離區(qū)域的RPE細胞中減少,而其抑制劑可以明顯增加RPE細胞的增殖和RPE細胞的遷移。本研究為復(fù)雜的PVR形成機制貢獻了新的研究方向,希望更多的團隊共同努力,早日攻克這一眼科領(lǐng)域的難點。

 

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