朊毒體病

(一)發(fā)病原因
非常規慢病毒致病因子被認為是一種淀粉樣蛋白原纖維(SAF)，構成此種原纖維特殊蛋白顆粒被稱(chēng)為朊病毒(PrP27-30)。這種慢病毒致病因子的性質(zhì)既有病毒性傳染發(fā)病特點(diǎn)，又有與常規病毒不同的理化特性和生物學(xué)特性。
理化特性表現為：
①具有高度抗各種消毒滅活能力;
②有抗高熱80～l00℃滅菌能力;
③具有抗紫外線(xiàn)和其他各種射線(xiàn)作用能力;
④常規電鏡看不到病毒，只有用特殊理化方法可發(fā)現原纖維和蛋白顆粒。
其生物學(xué)特性為：
①宿主間可傳遞的傳染性，潛伏期可長(cháng)達數年或數十年;
②病理為變性改變，可見(jiàn)淀粉樣斑塊和膠質(zhì)增生，但無(wú)炎性反應，亦無(wú)包涵體可見(jiàn);
③無(wú)復發(fā)緩解病程，持續進(jìn)展直至死亡;
④不產(chǎn)生干擾素，不受干擾素影響，孵育過(guò)程中不受任何免疫抑制或免疫增強的影響。
現在已知此慢病毒致病因子：
①在高熱132℃60min可滅活;
②亦可在10%次氯酸鈉溶液內浸泡1h以上或1N氫氧化鈉內浸泡30min，反復3次即可滅活。
(二)發(fā)病機制
1982年P(guān)rusiner提出CJD系由一種特殊的，具有感染性質(zhì)的蛋白質(zhì)-朊蛋白(Prion Protein，PrP)所引起，從而否定了多年前Gajdusek所倡導的非尋常慢病毒感染學(xué)說(shuō)。
PrP系一種單基因編碼的糖蛋白，由253個(gè)氨基酸組成(鼠為254個(gè)氨基酸組成)。位于人的第20號染色體短臂上，可譯框架由一個(gè)外顯子組成。在N的末端的附近由富有脯氨酸和甘氨酸的短肽5次反復。正常中樞神經(jīng)細胞表面也存在朊蛋白，稱(chēng)此為PrPc。分子量為30～33KD，其空間構象主要為α-螺旋狀結構，蛋白酶K可以溶解。而異常PrP被稱(chēng)作為PrPsc，PrPES或PrPCJD。與PrPc截然不同。分子量為27～30KD，其空間構象近40%為β層狀折疊。PrPSC數次的集結，則形成直徑為10～20nm，長(cháng)度100～200nm的物質(zhì)，這種物質(zhì)可能就是早期發(fā)現的羊瘙癢病相關(guān)原纖維(scrapic-associated-fiber，SAF)和朊蛋白質(zhì)粒(prion liposome)。它不能被蛋白酶K所消化。PrPSC大量沉積于腦內，能摧毀自身的中樞神經(jīng)系統，造成大腦廣泛的神經(jīng)細胞凋亡、脫失，形成海綿狀腦病。
PrPSC是怎樣進(jìn)入中樞神經(jīng)系統，又是怎樣從正常的PrPc轉變?yōu)楫惓５腜rPSC，其詳細途徑和機制仍在研究中。不過(guò)，不同類(lèi)型的CJD，其發(fā)生機制也不盡相同;一般來(lái)說(shuō)，醫源性CJD為傳遞感染，即將被PrPSC污染的組織或器械，通過(guò)腦深部電極檢查、顱腦手術(shù)、硬腦膜移植、以及反復接受從垂體提取的生長(cháng)激素或性激素肌注等，經(jīng)過(guò)長(cháng)達數年至數十年的復制而發(fā)病。家族性CJD則為PrP基因突變，即自體PrPc自發(fā)的發(fā)生結構改變，從而產(chǎn)生大量PrPSC，導致中樞神經(jīng)系統變性。而散發(fā)性CJD可能為體細胞突變的結果。
這種異常朊蛋白在體內沉積可受若干因素影響，而左右其發(fā)病及臨床表現。曾有人提出PrPSC是通過(guò)“內源性神經(jīng)毒”的作用，才使神經(jīng)細胞大量凋亡和脫失。所謂“內源性神經(jīng)毒”，包括興奮性氨基酸、各種細胞因子、自由基和一氧化氮等。PrPSC可能刺激神經(jīng)膠質(zhì)細胞分泌諸多的細胞因子、一氧化氮和自由基。自由基增多反過(guò)來(lái)又可以破壞神經(jīng)元的正常功能，而產(chǎn)生神經(jīng)細胞凋亡。不過(guò)，在諸多的影響發(fā)病因素當中，起著(zhù)主要、關(guān)鍵和直接作用的，莫過(guò)于基因的點(diǎn)突變和插入性突變。在散發(fā)性CJD中密碼子129(ATG-GTG)。180(GTC-ATC)，210(GAG-AAG)，208(CGC-CAC)位點(diǎn)突變時(shí)，直接影響CJD的臨床表現與經(jīng)過(guò)。這些事實(shí)，可以通過(guò)PrP基因檢測得到證實(shí)。
免疫組織化學(xué)染色，應用于朊蛋白感染疾病的診斷，無(wú)疑是一很大的貢獻。以PrP抗血清為第一抗體，發(fā)現與證實(shí)PrP在中樞神經(jīng)系統的存在與分布，并以此陽(yáng)性結果區別于其他原因所引起的癡呆。早在1988年Kitamoto和Tateishi對30例CJD，11例GSS及51例非朊蛋白感染疾病所致的癡呆的腦組織切片，進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色，結果表明CJD僅59.0% ，GSS 100.0%為陽(yáng)性。其余各類(lèi)變性疾病，如Alzheimer病、進(jìn)行性核上麻痹、Huntington舞蹈病、脊小腦性共濟失調、Pick病等均為陰性。但是原有的染色方法只能在病程長(cháng)于13個(gè)月的CJD腦切片中獲得陽(yáng)性結果，事實(shí)是病程長(cháng)于13個(gè)月的CJD，僅為該病的11%～61%，而病程較短的CJD仍為陰性。針對這一不足，近來(lái)有人成功地改進(jìn)了染色前的操作過(guò)程，名為水解高壓滅菌法(hydrolytic autoclaving)。這樣，即使病程短于13個(gè)月的CJD也能較好地呈現陽(yáng)性結果。