梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種慢性、系統性的性傳播疾病，傳播途徑多、傳染性強，對社會(huì )和人類(lèi)健康造成巨大危害。據國家衛生計生委疾病預防控制局發(fā)布的《2016年全國法定傳染病疫情概況》，2016年我國梅毒報告發(fā)病數居傳染病類(lèi)第三位，逾43萬(wàn)例，發(fā)病率高達31.967/10萬(wàn)。

日前，在西安舉辦的“2017中國醫師協(xié)會(huì )檢驗醫師年會(huì )暨第十二屆全國檢驗與臨床學(xué)術(shù)會(huì )議”上，四川大學(xué)華西醫院實(shí)驗醫學(xué)科陶傳敏教授分享了國際權威梅毒管理指南及國內外大型研究對于梅毒實(shí)驗室檢測方法和標準檢測流程的臨床應用評估及推薦，就梅毒感染的實(shí)驗室檢測策略及不同流程的應用進(jìn)行了深入分析與探討。

由于梅毒臨床表現復雜多樣，癥狀可能與其它疾病相似，臨床診療難度很大，準確、可靠、高效的檢測策略和方法是實(shí)現梅毒早期診斷和鑒別診斷的關(guān)鍵。實(shí)驗室亟需進(jìn)一步提高梅毒檢測水平，以期更好地指導臨床、有效控制梅毒傳播。

梅毒感染實(shí)驗室檢測首選特異性檢測方法

梅毒實(shí)驗室檢測方法主要分成三大類(lèi)：病原體檢測、核酸檢測和血清學(xué)檢測。病原體檢測主要是用暗視野顯微鏡和鍍銀染色，方法繁瑣不適合實(shí)驗室常規檢測；而核酸方法和病原體檢測都受病原體在局部的影響，容易發(fā)生漏檢。因此，血清學(xué)檢測是實(shí)驗室診斷梅毒的主要手段。

血清學(xué)檢測包括非梅毒螺旋體抗原試驗（NTT）和梅毒螺旋體抗原試驗（TT）。前者屬于非特異性抗體檢測，主要包括性病研究實(shí)驗室試驗（VDRL）、快速血漿反應素試驗（RPR）和甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST），這可能會(huì )在自身免疫性疾病患者或孕婦中呈假陽(yáng)性以及在晚期患者中呈假陰性。后者屬于特異性檢測，主要包括梅毒螺旋體血凝試驗/梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPHA/TPPA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA/EIA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA/CIA）等，這類(lèi)方法檢測的是梅毒螺旋體特異性抗體，特異性及敏感度均較高。

梅毒實(shí)驗室檢測流程主要包括傳統檢測流程和反向檢測流程，兩者的區別在于采用哪一種方法作為初篩的檢測手段。傳統檢測流程是先進(jìn)行NTT，結果陽(yáng)性的患者再進(jìn)行TT，結果陽(yáng)性確認新感染或曾經(jīng)治療過(guò)；反向檢測流程反之，對于TT結果陽(yáng)性的患者進(jìn)行NTT，若結果陰性再進(jìn)行第二種TT檢測，結果陽(yáng)性則表示近期再次感染或曾經(jīng)治療過(guò)。現在還有一種是歐洲疾病預防控制中心（ECDC）流程，這是一個(gè)更簡(jiǎn)化的反向流程，先進(jìn)行TT，結果陽(yáng)性的患者直接再進(jìn)行第二種TT檢測。

目前，對于梅毒的實(shí)驗室篩查與診斷流程，越來(lái)越多地傾向于用反向檢測流程。美國疾病控制中心發(fā)布的《2015性傳播疾病治療指南》提出反向流程對患者診斷更為全面，能夠檢測出既往治療過(guò)、未治療或不完全治療的梅毒患者，以及低感染率人群的假陽(yáng)性情況。《2014歐洲梅毒管理指南》推薦TT作為單獨的初篩方法，并應采用全自動(dòng)EIA/CIA，NTT只能檢測到現癥梅毒，相比TT會(huì )漏檢很早期的梅毒感染。《2015英國梅毒管理指南》也推薦EIA/CLIA作為初篩方法，同時(shí)檢測免疫球蛋白M（IgM）和免疫球蛋白G（IgG），并特別提到初篩陽(yáng)性后再用另一種TT方法進(jìn)行確認。

陶傳敏教授指出：“我國現在絕大部分實(shí)驗室和血站主要是用反向檢測流程，用特異性抗體首先開(kāi)始進(jìn)行篩查，對于篩查陽(yáng)性的患者建議做非特異性檢測，同時(shí)結合臨床表現和流行病學(xué)史進(jìn)行診斷。對性病門(mén)診患者沒(méi)有必要區分反向流程和傳統流程，應該建議患者同時(shí)做這兩類(lèi)不同的實(shí)驗室檢測，這樣可以節約時(shí)間。”

電化學(xué)發(fā)光檢測方法有效提高梅毒檢測質(zhì)量

梅毒螺旋體抗原極不穩定，試劑性能的優(yōu)異取決于更高的設計標準。對于免疫試劑的設計，抗原的篩選和制備工藝需要非常考究。羅氏診斷對抗原組合進(jìn)行嚴格篩選和評估，最終選取了最有優(yōu)勢的抗原成分進(jìn)行重組；同時(shí)優(yōu)化了抗原序列，以實(shí)現試劑的穩定性和特異性，并采用了易大規模生產(chǎn)的高可溶性抗原，配合羅氏專(zhuān)有的解決方案，即抗原伴侶的應用，與天然抗原極度接近的表位的表達，實(shí)現只與抗原伴侶結合，不和特異性抗體結合，從而降低假陽(yáng)性率。羅氏診斷Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗原特異性抗體電化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒于2014年8月正式在中國獲批上市。該技術(shù)使用雙抗原夾心法（DAGS）檢測梅毒螺旋體總抗體，血清樣本僅需10μL，在18分鐘時(shí)間內即可完成整個(gè)檢測過(guò)程，是目前可靠、高效的梅毒特異性檢測方法。

2015年，ClinicalandVaccineImmunology雜志發(fā)表了一項由全球6個(gè)國家8家研究中心參與的梅毒檢測國際多中心研究結果，四川大學(xué)華西醫院成為唯一一個(gè)中國中心，參加了歐洲同步的性能評估。結果顯示：與其它方法學(xué)梅毒檢測試劑相比，羅氏診斷Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗體檢測在靈敏度、特異性、臨床樣本敏感性等綜合性能表現最佳，并且可100%檢測出不同分期梅毒感染樣本。

2016年，微生物學(xué)領(lǐng)域經(jīng)典期刊JournalofClinicalMicrobiology雜志發(fā)表了一項對六種自動(dòng)化梅毒螺旋體抗體檢測方法的比較研究結果，對比其它方法學(xué)梅毒檢測試劑，Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗體檢測的敏感性、特異性和一致性表現優(yōu)異，其中，敏感性達到99.4%，特異性達到100%，一致性是99.8%，無(wú)一例假陽(yáng)性結果和漏檢情況發(fā)生。

陶教授指出：“臨床上有一些潛在因素，如合并其它傳染病、自身免疫性疾病、腫瘤、妊娠等，可能會(huì )干擾到梅毒的實(shí)驗室檢測結果，因此，選擇抗干擾能力強的檢測方法對于檢測結果的準確性至關(guān)重要。”Elecsys？Syphilis梅毒螺旋體抗體檢測采用抗干擾模式，可有效避免交叉反應，針對干擾樣本的評估研究顯示，具有極佳的特異性與靈敏度，對人類(lèi)免疫缺陷病毒感染、EB病毒（EBV）感染和萊姆病（Lyme）的特異性均達到100%。