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梅毒螺旋體明膠凝集試驗概述
梅毒螺旋體簡(jiǎn)明膠凝集試驗是用超聲裂解的梅毒螺旋體為抗原,致敏紅色明膠顆粒與人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體結合,產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)紅色凝集反應。
梅毒螺旋體明膠凝集試驗正常值
反應呈陰性。
梅毒螺旋體明膠凝集試驗臨床意義
1.TPPA試驗具有敏感性高、特異性強,是梅毒診斷較好的確證試驗。
2.TPPA試驗陽(yáng)性患者,由于記憶細胞抗體復制能力強,特異性試驗敏感性高,即使經(jīng)抗梅毒治療也終生陽(yáng)性,因此不能作為治療效果觀(guān)察的指標。但根據臨床觀(guān)察,早期梅毒患者血清如TPPA試驗為弱陽(yáng)性反應,隨時(shí)間延長(cháng)可能轉陰。
3.特異性試驗對一期梅毒可比非特異性試驗早一周出現。梅毒過(guò)程中最初出現的是IgM體,梅毒感染后第2周即可從血清測出,而IgG抗體則需在感染后第4周方可出現測出。
4.梅毒確證試驗,一般定性試驗陽(yáng)性,則可作梅毒診斷依據,必要時(shí)做定量試驗。經(jīng)有效治療后特異抗體滴度也可不同程度下降,但轉陰機會(huì )甚少。
此類(lèi)試驗特異性強,很少出現假陽(yáng)性。但據統計,也可以有1%生物學(xué)假陽(yáng)性存在。
異常結果:
①一期梅毒。即硬下疳 ,潛伏期2-4周,外生殖器部位發(fā)生暗紅色硬腫塊 、淺潰瘍 ,有軟骨樣硬度,周?chē)馨徒Y腫大。
②二期梅毒。在一期梅毒 1-2 個(gè)月之后,全身皮膚、粘膜發(fā)生對稱(chēng)泛發(fā)皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。粘膜可發(fā)生粘膜斑、扁平濕疣,傳染性強。
③三期梅毒。發(fā)生在感染后2-3年乃至10年,皮膚為樹(shù)膠樣腫,還可涉及骨、關(guān)節、心、血管,表現為主動(dòng)脈炎、主動(dòng)脈瓣閉鎖不全和主動(dòng)脈瘤等,侵及神經(jīng)為脊髓癆 ,全身麻痹 ( 麻痹性癡呆 )等等。
需要檢查的人群:有上述癥狀者。
梅毒螺旋體明膠凝集試驗檢查方法
材料:
1.溶解溶液A:用于溶解致敏顆粒C和非致敏顆粒D。
2.血清稀釋液B:用于稀釋血清標本。
3.致敏顆粒C。
4.非致敏顆粒D。
5.對照用陽(yáng)性血清E。
6.U型反應板。
方法:
(1)吸取B液100µl加入第8孔,B液25µl分別加入第1、2、3、4、5、6孔中。
(2)血清稀釋?zhuān)何〈龣z血清25µl放入第8孔,混勻后吸取25µl到第1孔,重復其稀釋步驟至第6孔時(shí),混勻后棄去25µl液體。
(3)滴加致敏和未致敏顆粒:混勻細胞工作液,第2孔加25µl未致敏顆粒;第3、4、5、6孔加25µl致敏顆粒;顆粒加入完畢,將反應板置微量振蕩器上振蕩30s,置濕盒內,15℃~25℃孵育2h觀(guān)察結果。
結果:
陽(yáng)性2+~4+:顆粒凝集覆蓋整個(gè)孔底,多邊形膜狀,邊緣粗糙。
陽(yáng)性1+: 顆粒凝集呈多邊形性粗糙大環(huán)狀。
可疑±: 顆粒濃集呈邊緣光滑小環(huán)狀。
陰性- : 顆粒聚集在孔底中央、光亮、邊緣光滑。
定量試驗以出現陽(yáng)性反應(1+)的最高稀釋度作為最終滴度。
梅毒螺旋體明膠凝集試驗注意事項
1.TPHA、TPPA反應板要清潔干凈,孔內無(wú)異物,以避免假陽(yáng)性。要用U形板,不能用V形板。
2.試劑盒不可置0℃以下以防止凍結,不同批號試劑間不可混合使用
3.試驗溫度適宜15℃-25℃,天熱時(shí)應將濕盒置空調室內。 4.如未致敏細胞出現凝集反應,應做重吸收試驗或改用其他確診試驗方法。
不合宜人群: 沒(méi)有 檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個(gè)人衛生。禁止進(jìn)行不潔性交。
檢查時(shí)要求:積極配合醫生。