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血液及骨髓標本的細菌學(xué)檢驗概述
血液及骨髓標本的細菌學(xué)檢驗是對血液及骨髓標本進(jìn)行氧化酶試驗、觸酶試驗和硝酸鹽還原試驗等等進(jìn)行判斷出標本中所含的細菌類(lèi)型與種類(lèi)。
血液及骨髓標本的細菌學(xué)檢驗正常值
各種致病性細菌檢驗呈陰性。
血液及骨髓標本的細菌學(xué)檢驗臨床意義
對細菌菌落涂片、革蘭染色,觀(guān)察細菌形態(tài)及染色性,如為革蘭陰性桿菌,進(jìn)行氧化酶試驗、觸酶試驗和硝酸鹽還原試驗,氧化酶陰性、觸酶試驗和硝酸鹽還原試驗陽(yáng)性者初步判斷為腸桿菌科細菌,接種KIA、MIU培養基。KIA、MIU培養基上的生化結果符合沙門(mén)菌屬者,用沙門(mén)菌屬診斷血清做玻片凝集后確認血清型;KIA、MIU培養基上的生化結果符合腸桿菌科其他菌屬,血液中常見(jiàn)革蘭陰性桿菌的初步鑒定等等。
異常結果:
出現菌血癥癥狀:
①驟起高熱,可到40-41度,或低溫,起病急,病情重,發(fā)展迅;
②頭痛、頭暈,惡心,嘔吐,可有意識障礙;
③心率加快、脈搏細速,呼吸急促或困難;
④肝脾可腫大,重者可黃疸,皮下出血斑等。
需要檢查的人群:黃疸,皮下出血斑,頭暈,惡心,嘔吐,高熱等疑似 菌血癥癥狀者。
血液及骨髓標本的細菌學(xué)檢驗檢查方法
1.標本采集懷疑為菌血癥的患者,一般應在發(fā)病初期采集,或在體溫上升期采取;原則上應在抗生素使用前采取,對已開(kāi)始抗生素治療的患者可在下次給藥前采取;
2.大多由肘靜脈采取,對亞急性細菌性心內膜炎的患者采集股動(dòng)脈血,也可在靠近感染病灶的部位采集。采血部位先用碘酒消毒,然后用75%酒精脫碘。成人采血量每次5~10ml,兒童1~2ml,分別注入硫酸鎂葡萄糖肉湯(需氧培養)和硫乙醇酸鈉肉湯(厭氧培養)培養瓶中,疑為沙門(mén)菌引起的腸熱癥可注入膽汁葡萄糖肉湯,輕輕搖動(dòng)混勻。
3.血液與培養基的比例應為1:10,可使血液中的抗菌物質(zhì)如原有抗生素、溶菌酶、抗體和補體等充分稀釋?zhuān)荒馨l(fā)揮抗菌活性。
血液及骨髓標本的細菌學(xué)檢驗注意事項
1.一般應在抗菌藥物使用前采集血液標本,如果患者已用過(guò)抗菌藥物或情況不明時(shí),應使用硫酸鎂肉湯增菌液,以中和四環(huán)素、鏈霉素、新霉素、多粘菌素等抗生素,并添加抗菌物質(zhì)拮抗劑如5%對氨基苯甲酸(PABA)拮抗磺胺類(lèi)、100IU/50ml青霉素酶破壞青霉素和加入0.03%~O.05 9/6聚茴香腦磺酸鈉(SPS)滅活氨基糖苷類(lèi)及多肽類(lèi)抗生素。
2.對疑為波浪熱、亞急性細菌性心內膜炎的患者,培養瓶應孵育至第四周,盲目翻種后無(wú)菌生長(cháng),方可報告陰性。
3.為了盡快發(fā)現病原菌,在7天的孵育期內應至少盲目翻種2次,第一次在標本孵育12~18h后。在以后的孵育期中應每天觀(guān)察瓶?jì)鹊淖兓缬屑毦L(cháng)現象,需及時(shí)接種和涂片染色觀(guān)察報告。7天孵育后仍無(wú)細菌生長(cháng)跡象,進(jìn)行盲目接種。每次接種需氧培養均需接種羊血平板和巧克力瓊脂平板;厭氧培養接種厭氧血瓊脂平板和羊血瓊脂平板,分別進(jìn)行需氧和厭氧培養。
4.血液細菌學(xué)培養是診斷菌血癥和敗血癥的病原學(xué)依據。常見(jiàn)的病原菌見(jiàn)表5—2。在同一患者的2份血液標本中檢出同一細菌;或檢出細菌的患者2~3周后血清中的相應抗體升高則可作出肯定的病原學(xué)結論。一般菌血癥由一種細菌引起,但也有同時(shí)兩種細菌的混合感染、兩種細菌或細菌和真菌的先后交替感染情況,有時(shí)也會(huì )出現不常見(jiàn)的細菌,這些情況不能隨意判定為污染菌。
5.采血次數及間隔在腦膜炎、細菌性肺炎等需馬上開(kāi)始抗菌治療的急性發(fā)熱性疾病;或急性骨髓炎、化膿性關(guān)節炎等需緊急手術(shù)的患者,應立即從兩臂分別取2份標本做血液細菌培養。對心內膜炎患者,在24h內采血3次,每次間隔不少于30min;必要時(shí)次日再采血2次。對不明原因發(fā)熱者2次抽血間隔60min;必要時(shí)于24~48h后再抽血2次。因為1次血培養不足以說(shuō)明問(wèn)題,且會(huì )遺漏陽(yáng)性結果。