腸道真菌病檢測概述
腸道真菌病多繼發(fā)于其他疾病,可由假絲酵母菌等引起,也可由鵝口瘡或皮膚黏膜假絲酵母菌所引起。
腸道真菌病檢測正常值
真菌培養陰性。
腸道真菌病檢測臨床意義
糞便鏡檢及培養對該病診斷有一定價(jià)值。但由于在正常情況下該菌可以生存,這樣就給本病的診斷帶來(lái)一定的困難,因此,不能單純依靠鏡檢或培養陽(yáng)性來(lái)確定是否有該菌的感染,必須結合其他的試驗結果分析判斷。 陽(yáng)性見(jiàn)于腸真菌病。
腸道真菌病檢測檢查方法
1.病原學(xué)檢查由于真菌廣泛分布于自然界,甚至空氣中也常有孢子飛揚,采集糞標本和檢查操作中,應盡可能減少污染,標本要新鮮。有些真菌傳染性很強如莢膜組織胞漿菌,應注意安全防護,以免造成實(shí)驗室人員感染。
直接鏡檢標本
以10%氫氧化鉀或生理鹽水制片,高倍鏡下發(fā)現大量菌絲和孢子有診斷意義。對于雙相型真菌,僅查到孢子可能是正常帶菌。真菌性腸炎的6種常見(jiàn)病原多數情況下直接鏡檢即可鑒定,但孢子、菌絲和其他背景物質(zhì)有時(shí)相互混淆,不易辨認。
①菌絲和孢子:菌絲粗細一致,除毛霉菌外均有分隔,可見(jiàn)不同角度的分支,細胞質(zhì)均勻,內含大小不等的顆粒。孢子多為圓形或卵圓形,多數大小一致,邊緣整齊,可見(jiàn)細胞構造。
②細胞壁:在氫氧化鉀溶液處理的標本中,細胞壁常變寬,連接成弧狀,類(lèi)似菌絲,但無(wú)菌絲的構造。
③石棉體:比菌絲更細,不分節,無(wú)菌絲顆粒。
④植物纖維:未消化的食物殘渣,邊緣不整,無(wú)分支。
⑤脂細胞:圓形,構造模糊,無(wú)細胞壁。
⑥磷脂小球:大小不一,形狀不整,無(wú)細胞構造。
⑦氫氧化鉀結晶:雪花樣或珊瑚狀,邊緣呈鋸齒形,折光性強。
⑧小水皰:圓形,透亮,無(wú)細胞構造。
染色鏡檢常用的染色方法
①革蘭染色:適用于念珠菌,孢子、菌絲染成藍色,但著(zhù)色不均。
②過(guò)碘酸錫夫染色(PA5):真菌孢子、菌絲均染成紅色。
③丫啶橙染色:熒光顯微鏡下真菌孢子呈亮綠色。
④吉姆薩染色和瑞特染色:適用于莢膜組織胞漿菌,染色前用甲醇固定,油鏡下菌體染成紅色,較小一端有出芽,菌體周?chē)幸蝗ηv膜樣結構,為此菌的細胞壁。通常菌體位于巨噬細胞或單核細胞內,少數位于細胞外。
⑤乳酸酚棉藍染色:適用于各種真菌培養涂片,菌體染成藍色。
真菌培養
糞標本直接鏡檢通常不容易確定菌種,需參考糞培養結果,觀(guān)察菌落形態(tài),再挑取菌落染色后鏡檢。常用沙保培養基和血瓊脂培養基。對于雙相型真菌還需在不同溫度下(25℃或37℃)分別培養,以便觀(guān)察其形態(tài)改變。
①大培養:是鑒別真菌的主要方法之一,可觀(guān)察菌落的生長(cháng)情況。根據菌落的生長(cháng)速度、形態(tài)、色澤等,初步判別菌種。
A.試管斜面:用白金環(huán)刺破瓊脂平面,分3點(diǎn)將標本接種于試管斜面培養基上。此法不易污染,但菌落較小。
B.培養皿:分3點(diǎn)將標本接種于平皿培養基中央,倒置后放恒溫箱中培養,每3天觀(guān)察1次菌落生長(cháng)情況。
②小培養:將大培養中生長(cháng)較好的菌落接種在玻片培養基上。培養1~3天后,在顯微鏡下觀(guān)察菌體的特征。
A.點(diǎn)片法:先將少許培養基成形于載玻片中央,再將菌種接種于培養基邊緣。覆以蓋玻片,置于有U形管的玻璃平皿中,培養后于不同時(shí)間取出鏡下觀(guān)察或染色鏡檢。
B.壓片法:將菌種接種在試管斜面或平皿培養基上,覆一蓋玻片,以便菌體向蓋玻片上生長(cháng),然后于適當時(shí)間取出置于載玻片上鏡檢。
腸道真菌病檢測注意事項
1、采集時(shí)請避免挖取沾到馬桶內尿液及自來(lái)水的部分;同時(shí)也請勿將糞便直接置于衛生紙或擦手紙上。
2、為避免干擾檢驗結果,請勿使用棉花棒挖取。
3、糞便采集量請勿過(guò)少,以避免無(wú)足夠的檢體以供檢驗。
4、若需要以化學(xué)法檢測糞便潛血時(shí),請于采集前三天避免進(jìn)食紅肉、肝臟及菠菜、甘藍、花椰菜等食物,以避免造成偽陽(yáng)性結果。
5、若是以免疫法檢測糞便潛血時(shí),您不需要限制飲食種類(lèi)。
6、因為嬰幼兒不容易一次取到足量的檢體,若需要分次收集時(shí),請將檢體暫時(shí)置于冰箱冷藏保存,以避免細菌滋生。