阿米巴原蟲(chóng)抗原概述
指檢測人體腸道中的溶組織內阿米巴致病后血液中的原蟲(chóng)抗原。
阿米巴原蟲(chóng)抗原正常值
酶聯(lián)免疫吸附試驗、間接免疫熒光法、直接免疫熒光法:陰性。
阿米巴原蟲(chóng)抗原臨床意義
阿米巴病最可靠的診斷依據是:糞便直接涂片顯微鏡檢查有溶組織內阿米巴原蟲(chóng)(滋養體或包囊),但誤診、漏診多。用免疫法檢測可彌補糞便鏡檢的不足。 阿米巴病的臨床表現可隨蟲(chóng)體寄生部位及宿主功能狀態(tài)的不同而有很大差異。攜帶者(蟲(chóng)體僅寄居于人體腸道中)可無(wú)任何臨床表現。當蟲(chóng)體侵犯宿主腸壁及其他組織時(shí)可產(chǎn)生多種臨床癥狀,其中最常見(jiàn)的臨床類(lèi)型為阿米巴痢疾和阿米巴肝膿腫。 陽(yáng)性:見(jiàn)于阿米巴肝膿腫、腸阿米巴病或帶蟲(chóng)者。
阿米巴原蟲(chóng)抗原檢查方法
阿米巴原蟲(chóng)抗原和抗體的測定原理:免疫熒光技術(shù)的原理是利用物質(zhì)吸收光能后,產(chǎn)生激發(fā)態(tài)而發(fā)光的特性。將具有這種特性的熒光素(異硫氰酸熒光黃或羅丹明B200)用化學(xué)方法結合在特異的抗體(抗原)的分子上,又不損害其抗體或抗原活性的一種熒光顯微鏡下的示蹤技術(shù)。抗體和抗原的結合是高度特異的,所以只要知道其中的一個(gè)因子,也就知道了另一個(gè)因子。免疫熒光技術(shù)就是利用上述兩種特性,把不可見(jiàn)的抗原抗體的反應(一抗)與被熒光素標記的抗體(抗抗體)反應,變?yōu)槿庋劭梢?jiàn)的熒光,再根據組織學(xué)和細胞學(xué)定位來(lái)判斷特異熒光所在。在熒光顯微鏡下我們所能見(jiàn)到的亮綠熒光,不是標本本身(無(wú)色)發(fā)出的,而是熒光物質(zhì)受到激發(fā)后而發(fā)出的亮綠熒光。熒光標記抗體技術(shù)稱(chēng)熒光抗體技術(shù),熒光標記抗原技術(shù)稱(chēng)熒光抗原技術(shù)。
試劑:
(1)熒光標記抗體(或抗原)。
(2)0.01mol/L pH7.2 PBS緩沖液。
(3)組織或細胞基質(zhì)片。
(4)緩沖甘油(pH7.2)。
(5)熒光顯微鏡。
(6)濕盒。
操作方法:
(1)抗原(或抗體)基質(zhì)片(各種組織冰凍切片或培養細胞等)基質(zhì)片從冰箱取出立即風(fēng)干。使用前經(jīng)無(wú)水乙醇或丙酮、甲醇等固定劑處理(根據實(shí)驗要求選擇固定劑)。一般固定3~15min,室溫晾干。
(2)被檢物(血清、腦脊液或其他滲出物等),根據需要用PBS適當稀釋?zhuān)?∶5或1∶10)滴于抗原基質(zhì)片上,置室溫或37℃溫箱反應30min~1h。
(3)0.01mol/L pH7.2 PBS沖洗15min(更換PBS 3次)。
(4)加熒光標記抗體,置室溫或37℃溫箱30min~1h。
(5)PBS沖洗同(3)。
(6)緩沖甘油(pH7.2)封片,熒光顯微鏡鏡檢。
阿米巴原蟲(chóng)抗原注意事項
1、采集時(shí)請避免挖取沾到馬桶內尿液及自來(lái)水的部分;同時(shí)也請勿將糞便直接置于衛生紙或擦手紙上。
2、為避免干擾檢驗結果,請勿使用棉花棒挖取。
3、糞便采集量請勿過(guò)少,以避免無(wú)足夠的檢體以供檢驗。
4、若需要以化學(xué)法檢測糞便潛血時(shí),請于采集前三天避免進(jìn)食紅肉、肝臟及菠菜、甘藍、花椰菜等食物,以避免造成偽陽(yáng)性結果。
5、若是以免疫法檢測糞便潛血時(shí),您不需要限制飲食種類(lèi)。
6、因為嬰幼兒不容易一次取到足量的檢體,若需要分次收集時(shí),請將檢體暫時(shí)置于冰箱冷藏保存,以避免細菌滋生。