萬(wàn)氏牛黃清心丸的主要成分是牛黃10g，朱砂60g，黃連200g，黃芩120g，梔子120g，郁金80g。主要用于治療流行性乙型腦炎，麻疹病毒性腦炎，麻疹后并發(fā)支氣管性肺炎，百日咳并發(fā)腦膜腦炎等。那么，萬(wàn)氏牛黃清心丸的測定方法是怎樣？

1、方法名稱(chēng)：萬(wàn)氏牛黃清心丸—黃連的測定—薄層掃描法

應用范圍：該方法采用薄層掃描法測定萬(wàn)氏牛黃清心丸中黃連的含量。

該方法適用于萬(wàn)氏牛黃清心丸中黃連的測定。

方法原理：供試品經(jīng)鹽酸-甲醇（1：100）加熱回流，過(guò)濾，用甲醇定量制成供試液，點(diǎn)樣，以苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水（4：2：1：1：0.2）為展開(kāi)劑，在另槽中加入等體積的濃氨試液，預平衡15分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，照薄層色譜掃描法進(jìn)行熒光掃描，激發(fā)波長(cháng)λ=366nm，測量供試品熒光強度的積分值與對照品熒光強度的積分值，計算其含量。

試劑：鹽酸、甲醇、乙酸乙酯、異丙醇、苯

儀器設備：薄層掃描儀、點(diǎn)樣器（一般采用微升毛細管或與之相應的點(diǎn)樣器材）、展開(kāi)室（可用適合薄層板大小的專(zhuān)用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉）。

2、材料：玻板（用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干）。吸附劑（硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。）

試樣制備：A、對照品溶液的制備：精密稱(chēng)取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇制成每1mL各含0.02mg的溶液，作為對照品溶液。B、供試品溶液的制備：取裝量差異項下該品適量，剪碎，取適量，精密稱(chēng)定，精密加入等量的硅藻土，研勻，精密稱(chēng)取約1.6g，置索氏提取器中，加鹽酸-甲醇（1：100）混合液適量，加熱回流提取至提取液無(wú)色，提取液移至100mL量瓶中，用少量鹽酸-甲醇（1：100）混合液洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加混合液至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應準確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

3、操作步驟：A、薄層板制備：將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm）取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預制板。

B、點(diǎn)樣：精密吸取供試品溶液4μL、對照品溶液2μL與6μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線(xiàn)距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

C、展開(kāi)：將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水（4：2：1：1：0.2）為展開(kāi)劑，在另槽中加入等體積的濃氨試液，預平衡15分鐘，展開(kāi)，取出，晾干，取出，晾干。

D、含量測定：在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)媚z布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長(cháng)進(jìn)行掃描，波長(cháng)：λS=510nm，λR=700nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

用外標法測定時(shí)，若對照品各數據點(diǎn)在校正曲線(xiàn)上呈一通過(guò)原點(diǎn)的直線(xiàn)時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過(guò)原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

溫馨提示：如在用藥過(guò)程有任何不良反應或疑惑，可向方舟健客在線(xiàn)醫生咨詢(xún)，熱線(xiàn)電話(huà):400-086-5111。

（實(shí)習編輯：葉思敏）