小兒腸系膜淋巴結結核別名:小兒腸系膜萎縮
小兒腸系膜淋巴結結核 的檢查:
1.涂片與培養 從漿膜腔液中找到抗酸桿菌是診斷結核病的重要手段,但陽(yáng)性率低,僅20%~30%。此外,尚可將標本接種豚鼠做結核菌培養,結核菌生長(cháng)緩慢,4~6周后才出現典型病理改變。近年來(lái)應用的Bactec460快速培養鑒定系統,采用有放射性營(yíng)養物(14C棕櫚酸)為底物的7H12分枝桿菌培養基,結核菌生長(cháng)期可縮短至1~3周,檢測結核桿菌需9天,可鑒別結核桿菌與非結核分枝桿菌,藥敏試驗另需3~5天。1991年應用雙相培養技術(shù)Rocheseptichek-AFB系統快速分離結核桿菌,可在2~4周出報告。抗酸菌L型菌是細胞和菌落形態(tài)的一種變異,用常規方法難于培養,抗酸染色不易被發(fā)現。國內應用改良的胰胨大豆蛋白瓊脂培養基(TSA-L)、快速蛋白胨瓊脂牛血清培養基、羊血培養基分離培養L型結核桿菌,1998年報道在260例復治、難治肺結核病人中培養出L型結核桿菌,陽(yáng)性率29.6%。
2.結核桿菌抗體檢測 過(guò)去用天然抗原PPD等檢測抗體(PPD-IgG、PPD- IgM),敏感性及特異性均差。近十余年來(lái)由于制備了結核桿菌的純化或半純化的抗原,使結核桿菌特異性抗體檢測有了顯著(zhù)進(jìn)展。目前常用的抗原有半純化的結核桿菌抗原5、抗原6、AOO抗原;半純化的糖脂抗原如糖脂SAGA1、B1和C、酚糖脂(PGL-Tb1)、脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原、硫脂類(lèi)(SL-Ⅰ、SL-Ⅳ)、TB-C-1抗原、脂多糖(LPS)等;純化的抗原有結核蛋白抗原(38kDa、30/31kDa、71kDa、45kDa、14kDa、19kD3a結核桿菌抗原)、重組38kDa結核蛋白。
(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):用于檢測結核病人血清、腦脊液及漿膜腔液中的抗結核抗體,可作為輔助診斷指標。應半純化抗原的ELISA的敏感性為65%~85%,對痰涂片陰性的肺結核敏感性為53%~62%,對肺外結核病敏感性為34%~40%,特異性95%。應用38kDa純化抗原的ELISA檢測抗體,敏感性為73%,對痰涂片陰性的肺結核敏感性為70%,特異性98%。應用抗原5的ELISA檢測結核性腦膜炎患者腦脊液中特異性抗體,敏感性70%,特異性100%。
(2)酶聯(lián)免疫電泳技術(shù)(ELIEP):是將ELISA與電泳結合起來(lái)的一項免疫技術(shù),是各種結核病輔助診斷的血清學(xué)方法。
3.結核桿菌抗原檢測 應用ELISA、乳膠凝集試驗、反向被動(dòng)血凝試驗等方法檢測體液中的結核桿菌抗原。如應用ELISA方法檢測腦脊液中的結核桿菌34kDa細胞漿蛋白(抗原5)以診斷結核性腦膜炎,敏感性80%,特異性100%。用雙抗體夾心ELISA方法檢測腦脊液、腹水、胸腔積液中的結核桿菌43kDa免疫顯性抗原,敏感性100%,特異性96%。應用協(xié)同凝集試驗測定脂阿拉伯甘露聚糖抗原,敏感性85%~90%,特異性93%。應用免疫印跡技術(shù)(Western blot)檢測結核桿菌抗原,敏感性89.7%,特異性95.7%,對肺外結核、痰涂片陰性肺結核病有診斷意義。
4.結核桿菌結構成分測定 應用氣相色譜-質(zhì)譜分析的方法,檢測血清、腦脊液中結核桿菌的菌體結構成分,即結核硬脂酸(10-甲基十八烷酸),具有較高的特異性及敏感性。應用頻率脈沖電子捕獲氣相色譜法測定腦脊液中結核桿菌的羧酸,敏感性 95%,特異性91%,但所需設備及技術(shù)復雜、昂貴。
5.分子生物學(xué)檢查
(1)DNA探針?lè )肿与s交:DNA探針?lè )椒z測臨床標本的敏感性不高,標本中細菌數1萬(wàn)/ml時(shí)才呈陽(yáng)性。用吖啶酯(acridinium ester)標記的基因探針技術(shù)及化學(xué)發(fā)光測定系統取代酶標顯色系統,可提高敏感性,能鑒定多種分枝桿菌,快速檢測結核桿菌。應用細菌熒光酶檢測雜交信號,可提高敏感性100倍。
(2)聚合酶鏈式反應(PCR):選擇性地擴增對結核桿菌復合物有特異性的MPB64蛋白質(zhì)的編碼基因片段,能將此極微量的DNA樣品放大幾十萬(wàn)倍以上,數小時(shí)可得結果,快速、敏感、特異性強。但較易產(chǎn)生假陽(yáng)性和假陰性結果。應用PCR擴增結核桿菌特異性插入序列IS6110,檢測痰標本,陽(yáng)性率93%,假陽(yáng)性率2.9%。國內馬路應用巢式PCR測定病理標本、痰標本等的結核桿菌DNA,無(wú)假陽(yáng)性。有人應用巢式PCR檢測結核病人外周血單個(gè)核細胞中結核桿菌的特異性重復插入序列IS6110,陽(yáng)性率64%,高于痰涂片的32%與痰培養的35%。 (3)DNA指紋技術(shù):分析細菌染色體的限制性?xún)惹忻该盖衅蔚奶禺愋詭ёV如DNA插入序列IS6110,以鑒定菌株,用于流行病學(xué)研究。
(4)結核桿菌耐藥基因檢測:應用PCR-單鏈構象多態(tài)性(PCR-SSCP)分析、PCR-限制性片段長(cháng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析、PCR-DNA序列測定,研究結核桿菌耐藥基因。
(5)基因芯片(gene chip)技術(shù):將許多DNA探針以一定順序及排列方式固定于固相載體上,構成探針矩陣,與待測DNA雜交,可同時(shí)獲得大量基因信息。1999年美國研制了測定分枝桿菌種間多態(tài)性的16SrRNA基因芯片,用于鑒定結核桿菌與其他非結核分枝桿菌。另一種為分析耐藥結核菌株rpoB基因型的基因芯片,用于分析rpoB基因突變。
6.血沉 結核病活動(dòng)期血沉可以加快。抗結核治療后,血沉逐漸下降,則更說(shuō)明原來(lái)有活動(dòng)性病變。血沉檢查無(wú)特異性,血沉正常不能除外活動(dòng)性結核。
腹部X線(xiàn)平片中多發(fā)性、大小不一的鈣化灶對確診有幫助。在鑒別診斷中應與腸系膜淋巴結炎、急慢性闌尾炎、腸梗阻等區別,腹腔如有巨大包塊應與淋巴肉瘤、神經(jīng)纖維瘤鑒別。B超可見(jiàn)腫大的淋巴結或腹水。
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