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淋球菌性腹膜炎別名:淋菌性腹膜炎

淋球菌性腹膜炎 的檢查:

淋球菌抗體檢測 氧化酶試驗

1.外周血象 白細胞計數>15×109/L,中性粒細胞增多。
2.細菌學(xué)檢查
(1)分泌物鏡檢:
①尿道(男性)或陰道分泌物鏡檢:可有大量紅色多形核白細胞。在有些細胞中吞噬有淋球菌。淋球菌為革蘭陰性,呈卵圓形或圓形,常成雙排列,兩菌接觸面扁平或稍凹。菌體長(cháng)約0.7μm,寬約0.5μm。但兩菌大小可有差異。多數多形核白細胞中并不含淋球菌,但不少白細胞中常含有1對至數對,甚至數十對淋球菌。淋球菌常位于細胞質(zhì)內(圖1)。
病期較長(cháng)或經(jīng)過(guò)治療的淋病患者,其分泌物涂片中淋球菌數目較少,有時(shí)呈單個(gè)、四聯(lián)和八疊狀,且常位于細胞外(圖2)。
尿道分泌物標本制作法:用浸有滅菌等滲鹽水的拭子揩洗尿道口,然后用手指由后向前擠出膿液,用棉拭子蘸取膿液后輕輕涂布于載玻片上。待自然干燥后加熱固定,染色(常用革蘭染色,也可用亞甲藍染色),鏡檢。
②腹腔分泌物檢查:腹腔穿刺抽液,膿液呈黃白色、稀薄、量少,無(wú)臭味。涂片可找到淋病雙球菌或PCR球菌,DNA檢查陽(yáng)性。
③注意事項:
A.淋病的診斷標準是可見(jiàn)“細胞內革蘭陰性雙球菌”,故涂片宜動(dòng)作輕柔,且棉拭子不得在玻片上滾動(dòng),以防止細胞破裂或變形,細菌從細胞內逸出,造成診斷上的混淆。
B.涂片薄厚適當。涂片過(guò)厚易造成脫色時(shí)間不足,使革蘭陰性菌也呈現紫色。大量染片時(shí),最好用已知的革蘭陽(yáng)性菌(如葡萄球菌)和陰性菌(如大腸埃希菌)作對比觀(guān)察。
C.固定涂片時(shí),只需迅速通過(guò)火焰2~3次即可,避免加熱過(guò)度致細胞變形。一般涂片至手背之上以不感到太燙為宜。
(2)淋球菌培養:淋球菌培養是WHO推薦的淋病篩查的惟一方法,也是診斷的“金標準”。
常用血液瓊脂或巧克力瓊脂培養基培養。為抑制雜菌,可加入適量抗菌物質(zhì),如多黏菌素B(25μg/ml)和萬(wàn)古霉素(3.3μg/ml)等。
淋球菌在血平皿上經(jīng)24~48h的培養后,可形成圓形、凸起、濕潤、光滑、半透明或灰白色菌落,邊緣呈花瓣狀,直徑為0.5~1.0mm,用接種環(huán)觸之有黏性(圖3)。如繼續培養,菌落面積增大,表面變得粗糙,邊緣出現皺縮。若從菌落上取材作涂片,可見(jiàn)到菌的大小及染色的深度有差異,排列也不一致,約有25%的菌為典型的雙球菌,其他75%為單球菌、四聯(lián)形或八疊形。
使用液體培養基時(shí),淋球菌生長(cháng)于液體表面,稍有輕度混濁和顆粒沉淀。
培養標本采集和送檢中應注意:
①深部取材:從男性尿道取材時(shí),應將細小棉拭子伸入到尿道內2~4cm處,取出帶有黏膜細胞的分泌物。從女性宮頸取材時(shí),應先用溫水濕潤擴陰器(不要用液體石蠟等潤滑油),然后將棉拭子插入宮頸管1.0~1.5cm,轉動(dòng)并停留10~30s。有時(shí)為了提高陽(yáng)性率,可同時(shí)取2份標本進(jìn)行培養,但工作量也相應增加。
②及時(shí)送檢、接種:淋球菌對環(huán)境變化敏感,耐寒、耐干的能力弱。因此,標本離體后要立即送檢。若實(shí)驗室較遠,可將標本接種于Stuart或Amies運送培養基或浸入1%葡萄糖肉液浸中,途中保溫。
(3)氧化酶試驗:是淋球菌重要的初步診斷試驗之一。淋球菌在生長(cháng)過(guò)程中能產(chǎn)生氧化酶。在經(jīng)24~48h培養的菌落上滴加氧化酶試劑(0.5%~1%鹽酸二甲基對苯二胺或鹽酸四甲基對苯二胺水溶液),其菌落變成紫紅乃至黑色者為陽(yáng)性反應。但氧化酶試驗陽(yáng)性者并不完全是淋球菌。
為保證氧化酶試驗結果的準確性,操作中應注意3個(gè)問(wèn)題:
①氧化酶試劑要新鮮:正常的氧化酶試劑(鹽酸二甲基對苯二胺或鹽酸四甲基對苯二胺)為淡紅色。若試劑變成灰色或黑色,說(shuō)明已經(jīng)失效。配制的試劑溶液需放在棕色玻璃瓶中避光保存,有效使用時(shí)間約1周。
②避免使用鐵質(zhì)接種環(huán):氧化酶試劑與鐵離子接觸會(huì )產(chǎn)生紅色的化學(xué)變化,造成“陽(yáng)性”假象,故淋球菌接種應避免使用舊鐵絲或電爐絲等制成的接種環(huán)。試驗前亦應檢查接種環(huán)與試劑接觸是否有紅色出現。
③需要保留菌種時(shí),應在菌落尚未完全變黑時(shí)挑出少許轉種。菌落一旦變黑,多數細菌即告死亡。
(4)過(guò)氧化氫酶試驗:淋球菌可產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶。該酶能使過(guò)氧化氫迅速分解成水和氧氣,出現氣泡。用作淋球菌的初步鑒定。
①方法:用接種環(huán)挑取一菌落置于干凈載玻片上,取30%(V/V)過(guò)氧化氫溶液1滴加于可疑菌落表面,在1s內有大量氣泡產(chǎn)生,為陽(yáng)性反應。如反應遲緩或產(chǎn)生氣泡弱為陰性反應。
②注意:某些非致病的奈瑟菌亦可為陽(yáng)性反應。陰性反應可除外淋球菌。
(5)直接免疫熒光試驗:將熒光素標記的淋球菌抗血清(單克隆抗體)滴于可疑菌上,遇到淋球菌(抗原)時(shí),抗體與抗原結合,在熒光顯微鏡下可見(jiàn)到發(fā)蘋(píng)果綠色熒光的菌體。本法檢測快速、死菌亦可有陽(yáng)性反應。
(6)酶反應:淋球菌具有特殊的酶類(lèi),能使某些酶的產(chǎn)色底物顯色,據此與其他奈瑟菌區別開(kāi)來(lái)。臨床用于淋球菌鑒定。
選擇做腹部B超及腹平片檢查。

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